ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಎರಡು ಪೀಕ್ಗಳ ನಡುವಿನ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಗುಣಮಟ್ಟವನ್ನು ಅಳೆಯಲು ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ (Rₛ) ಅತ್ಯಂತ ಪ್ರಮುಖವಾದ ನಿಯತಾಂಕವಾಗಿದೆ. ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಕ್ಯಾಲ್ಕುಲೇಟರ್ ಎರಡು ಪೀಕ್ಗಳ ನಡುವಿನ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಅನ್ನು ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲು ಮತ್ತು ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಗುಣಮಟ್ಟದ ಗುಣಾತ್ಮಕ ತೀರ್ಪನ್ನು ಒದಗಿಸಲು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾದ ಉಚಿತ ಆನ್ಲೈನ್ ಸಾಧನವಾಗಿದೆ. ಬಳಕೆದಾರರು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಿದ ಮೋಡ್ಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ, ಪೀಕ್ ರಿಟೆನ್ಷನ್ ಟೈಮ್ಗಳು ಮತ್ತು ಅಗಲಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ ಅಥವಾ ಕಾಲಮ್ನ ಡೆಡ್ ಟೈಮ್, ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಪ್ಲೇಟ್ಗಳು ಮತ್ತು ಸೆಲೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯಂತಹ ನಿಯತಾಂಕಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಬಹುದು. ಲೆಕ್ಕಹಾಕಿದ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಜೊತೆಗೆ, ಈ ಉಪಕರಣವು ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಗುಣಮಟ್ಟದ ದೃಶ್ಯ ಸ್ಕೇಲ್ ಅನ್ನು ಮತ್ತು ಬಳಕೆದಾರರ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸಂಖ್ಯೆಗಳನ್ನು ಆದೇಶಿಸಿದ ಸಂಪೂರ್ಣ ಗಣಿತದ ಸೂತ್ರವನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತದೆ.
ಗಣಿತದ ಸೂತ್ರಗಳು ಮತ್ತು ಲೆಕ್ಕಾಚಾರದ ವಿಧಾನಗಳು
ಬಳಕೆದಾರರು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡುವ ಪ್ರಾರಂಭದ ಡೇಟಾ ಮೋಡ್ಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಕ್ಯಾಲ್ಕುಲೇಟರ್ ವಿಭಿನ್ನ ಸೂತ್ರಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರಮುಖವಾಗಿ ಎರಡು ವಿಧಾನಗಳು ಲಭ್ಯವಿವೆ:
1. ಪೀಕ್ ಅಗಲಗಳ ವಿಧಾನ (Peak widths)
ಈ ಮೋಡ್ನಲ್ಲಿ, ಅಗಲವನ್ನು ಎಲ್ಲಿ ಅಳೆಯಲಾಗಿದೆ ಎಂಬುದರ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಎರಡು ವಿಭಿನ್ನ ಸೂತ್ರಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ:
- ಬೇಸ್ಲೈನ್ ಅಗಲ (Baseline (USP 2×)): ಟ್ಯಾಂಜೆಂಟ್ ಅಗಲಗಳನ್ನು ಬೇಸ್ಲೈನ್ನಲ್ಲಿ ಅಳೆದಾಗ ಈ ಸೂತ್ರವನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. Rₛ = 2(t_R2 - t_R1) ÷ (w₁ + w₂) ಇದು USP <621> ಮಾನದಂಡಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿದೆ.
- ಅರ್ಧ ಎತ್ತರದ ಅಗಲ (Half height (USP 1.18×)): ಪೀಕ್ನ ಅರ್ಧ ಎತ್ತರದಲ್ಲಿ ಅಗಲವನ್ನು ಅಳೆದಾಗ ಈ ಸೂತ್ರವನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. Rₛ = 1.18(t_R2 - t_R1) ÷ (w_(1 / 2,1) + w_(1 / 2,2)) ಇದು USP <621> ಮತ್ತು Ph.Eur. 2.2.46 ಮಾನದಂಡಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿದೆ.
2. ಕಾಲಮ್ ಪ್ಯಾರಾಮೀಟರ್ಗಳ ವಿಧಾನ (Column parameters)
ಕಾಲಮ್ನ ದಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ಸೆಲೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಅನ್ನು ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲು ಪರ್ನೆಲ್ (Purnell) ಸೂತ್ರವನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. Rₛ = (√(N) ÷ 4) · ((α - 1) ÷ α) · (k′₂ ÷ (1 + k′₂)) ಇಲ್ಲಿ N ಎಂಬುದು ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಪ್ಲೇಟ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ, α ಎಂಬುದು ಸೆಲೆಕ್ಟಿವಿಟಿ ಮತ್ತು k′₂ ಎಂಬುದು ಎರಡನೇ ಪೀಕ್ನ ರಿಟೆನ್ಷನ್ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಆಗಿದೆ.
ಇನ್ಪುಟ್ ನಿಯತಾಂಕಗಳು ಮತ್ತು ಸೆಟ್ಟಿಂಗ್ಗಳು
ನಿಖರವಾದ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಬಳಕೆದಾರರು ಕೆಳಗಿನ ಇನ್ಪುಟ್ಗಳನ್ನು ಒದಗಿಸಬೇಕು:
- ಪ್ರಾರಂಭದ ಡೇಟಾ: "ಪೀಕ್ ಅಗಲಗಳು" ಅಥವಾ "ಕಾಲಮ್ ಪ್ಯಾರಾಮೀಟರ್ಗಳು" ಇವೆರಡರಲ್ಲಿ ಒಂದನ್ನು ಆರಿಸಿಕೊಳ್ಳಬೇಕು.
- ಅಗಲವನ್ನು ಇಲ್ಲಿ ಅಳೆಯಲಾಗಿದೆ: "ಪೀಕ್ ಅಗಲಗಳು" ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಿದಾಗ ಇದು ಸಕ್ರಿಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಇಲ್ಲಿ "ಬೇಸ್ಲೈನ್ (USP 2×)" ಅಥವಾ "ಅರ್ಧ ಎತ್ತರ (USP 1.18×)" ಅನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬಹುದು.
- ಮೊದಲ ಪೀಕ್ ರಿಟೆನ್ಷನ್ ಟೈಮ್ t_R1 ಮತ್ತು ಎರಡನೇ ಪೀಕ್ ರಿಟೆನ್ಷನ್ ಟೈಮ್ t_R2: ಇವು ಧನಾತ್ಮಕ ಸಂಖ್ಯೆಗಳಾಗಿರಬೇಕು.
- ಮೊದಲ ಪೀಕ್ ಅಗಲ w₁ ಮತ್ತು ಎರಡನೇ ಪೀಕ್ ಅಗಲ w₂: "ಪೀಕ್ ಅಗಲಗಳು" ಮೋಡ್ನಲ್ಲಿ ಮಾತ್ರ ಸಕ್ರಿಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ.
- ಡೆಡ್ ಟೈಮ್ t_M ಮತ್ತು ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಪ್ಲೇಟ್ಗಳು N: "ಕಾಲಮ್ ಪ್ಯಾರಾಮೀಟರ್ಗಳು" ಮೋಡ್ನಲ್ಲಿ ಮಾತ್ರ ಸಕ್ರಿಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ.
- ನಮೂದಿಸಿದ ಮೌಲ್ಯಗಳ ಯೂನಿಟ್: ನಿಮಿಷಗಳು ಅಥವಾ ಸೆಕೆಂಡುಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲು ಡ್ರಾಪ್ಡೌನ್ ಇರುತ್ತದೆ. Rₛ ಒಂದು ಅನುಪಾತವಾಗಿರುವುದರಿಂದ ಯೂನಿಟ್ಗಳು ರದ್ದಾಗುತ್ತವೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಎಲ್ಲಾ ಇನ್ಪುಟ್ಗಳು ಒಂದೇ ಯೂನಿಟ್ ಹೊಂದಿದ್ದರೆ ಸಾಕು (ಉದಾಹರಣೆಗೆ TLC ಪ್ಲೇಟ್ಗಳಿಗೆ ಮಿಲಿಮೀಟರ್ಗಳೂ ಸಹ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತವೆ).
- ಪ್ರದರ್ಶಿಸಲಾಗುವ ದಶಮಾಂಶಗಳು: ಔಟ್ಪುಟ್ನ ದಶಮಾಂಶ ನಿಖರತೆಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವ ಸೆಟ್ಟಿಂಗ್.
ಬಳಕೆದಾರರು ಸುಲಭವಾಗಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು "ಉದಾಹರಣೆಯನ್ನು ಲೋಡ್ ಮಾಡಿ" ಬಟನ್ ಮತ್ತು ಎಲ್ಲಾ ಇನ್ಪುಟ್ಗಳನ್ನು ಮರುಹೊಂದಿಸಲು "ತೆರವುಗೊಳಿಸಿ" ಬಟನ್ ಇಂಟರ್ಫೇಸ್ನಲ್ಲಿದೆ.
ಔಟ್ಪುಟ್ ಮತ್ತು ಮಧ್ಯಂತರ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು
ಲೆಕ್ಕಾಚಾರ ಮುಗಿದ ನಂತರ, ಉಪಕರಣವು "ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್" ಮತ್ತು "ಸೂತ್ರ ಮತ್ತು ಆದೇಶಿಸುವಿಕೆ" ವಿಭಾಗಗಳ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಈ ಕೆಳಗಿನ ವಿವರಗಳನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತದೆ:
- ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ Rₛ: ಲೆಕ್ಕಹಾಕಿದ ಅಂತಿಮ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಮೌಲ್ಯ.
- ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ತೀರ್ಪು: ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಮೌಲ್ಯದ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಗುಣಾತ್ಮಕ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನವನ್ನು ತೋರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ:
- "ಕಳಪೆಯಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕಗೊಂಡಿದೆ — ಪೀಕ್ಗಳು ಇನ್ನೂ ಅತಿಕ್ರಮಿಸುತ್ತಿವೆ"
- "ಭಾಗಶಃ ಪ್ರತ್ಯೇಕಗೊಂಡಿದೆ"
- "ಬೇಸ್ಲೈನ್ ಪ್ರತ್ಯೇಕಗೊಂಡಿದೆ"
- ದೃಶ್ಯ ಸ್ಕೇಲ್: 0 ರಿಂದ 2 ರವರೆಗಿನ ಸ್ಕೇಲ್ ಇದಾಗಿದ್ದು, 1.0 ಭಾಗಶಃ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯನ್ನು ಮತ್ತು 1.5 ಬೇಸ್ಲೈನ್ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.
- ಪೀಕ್ ಅಂತರ Δ t_R: ಎರಡು ರಿಟೆನ್ಷನ್ ಟೈಮ್ಗಳ ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸ.
- ಎರಡು ಅಗಲಗಳ ಮೊತ್ತ: ಪೀಕ್ ಅಗಲಗಳ ಮೋಡ್ನಲ್ಲಿ ಪ್ರದರ್ಶಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
- ರಿಟೆನ್ಷನ್ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ k′₁ ಮತ್ತು k′₂: ಕಾಲಮ್ ಪ್ಯಾರಾಮೀಟರ್ಗಳ ಮೋಡ್ನಲ್ಲಿ ಪ್ರದರ್ಶಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
- ಸೆಲೆಕ್ಟಿವಿಟಿ α: ಎರಡು ಪೀಕ್ಗಳ ನಡುವಿನ ಸೆಲೆಕ್ಟಿವಿಟಿ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್.
- Rs = 1.5 ಗಾಗಿ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಪ್ಲೇಟ್ಗಳು: ಬೇಸ್ಲೈನ್ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯನ್ನು ಸಾಧಿಸಲು ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಪ್ಲೇಟ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ.
- ಹಂತ-ಹಂತದ ಆದೇಶಿಸುವಿಕೆ: ಮಧ್ಯಂತರ ಲೆಕ್ಕಾಚಾರಗಳಾದ
ΔtR,w₁ + w₂,k′₁,k′₂,αಮತ್ತು ಅಂತಿಮRsಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಸೂತ್ರದಲ್ಲಿ ಆದೇಶಿಸಿ ತೋರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಬಳಕೆದಾರರು ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಸುಲಭವಾಗಿ ನಕಲಿಸಲು "ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ನಕಲಿಸಿ" ಬಟನ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು.
ನಿಯಮಗಳು ಮತ್ತು ಇನ್ಪುಟ್ ಮೌಲ್ಯೀಕರಣ
ನಿಖರವಾದ ಲೆಕ್ಕಾಚಾರಕ್ಕಾಗಿ ಉಪಕರಣವು ಕೆಲವು ಕಟ್ಟುನಿಟ್ಟಾದ ನಿಯಮಗಳನ್ನು ಅನುಸರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ತಪ್ಪು ಇನ್ಪುಟ್ಗಳಿಗೆ ದೋಷ ಸಂದೇಶಗಳನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತದೆ:
- ಸಂಖ್ಯೆಯಲ್ಲದ ಇನ್ಪುಟ್: ನಮೂದಿಸಿದ ಮೌಲ್ಯವು ಸಂಖ್ಯೆಯಲ್ಲದಿದ್ದರೆ,
"‹field›: “‹token›” ಎಂಬುದು ಒಂದು ಸಂಖ್ಯೆಯಲ್ಲ."ಎಂಬ ದೋಷ ಸಂದೇಶ ಬರುತ್ತದೆ. - ಶೂನ್ಯ ಅಥವಾ ಋಣಾತ್ಮಕ ಮೌಲ್ಯಗಳು: ರಿಟೆನ್ಷನ್ ಟೈಮ್, ಪೀಕ್ ಅಗಲ, ಡೆಡ್ ಟೈಮ್ ಅಥವಾ ಪ್ಲೇಟ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ ಶೂನ್ಯ ಅಥವಾ ಅದಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿದ್ದರೆ ಸೂಕ್ತ ದೋಷ ಸಂದೇಶಗಳು ಪ್ರದರ್ಶಿತವಾಗುತ್ತವೆ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ:
ಡೆಡ್ ಟೈಮ್ ಶೂನ್ಯಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿರಬೇಕು.ಅಥವಾಪ್ಲೇಟ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯು ಶೂನ್ಯಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿರಬೇಕು.). - ರಿಟೆನ್ಷನ್ ಕ್ರಮ: ಎರಡನೇ ಪೀಕ್ ಮೊದಲನೆಯದಕ್ಕಿಂತ ಮೊದಲು ಬರಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ. ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ,
"ಎರಡನೇ ಪೀಕ್ ಮೊದಲನೆಯದರ ನಂತರ ಹೊರಹೊಮ್ಮಬೇಕು — ಅವುಗಳು ಅದಲುಬದಲಾಗಿದ್ದರೆ ರಿಟೆನ್ಷನ್ ಟೈಮ್ಗಳನ್ನು ಪರಸ್ಪರ ಬದಲಾಯಿಸಿ."ಎಂಬ ಸಂದೇಶ ಕಾಣಿಸುತ್ತದೆ. - ಡೆಡ್ ಟೈಮ್ ಮಿತಿ: ಮೊದಲ ಪೀಕ್ ಡೆಡ್ ಟೈಮ್ಗಿಂತ ಮೊದಲು ಹೊರಹೊಮ್ಮಿದರೆ,
"ಮೊದಲ ಪೀಕ್ ಡೆಡ್ ಟೈಮ್ ನಂತರ ಹೊರಹೊಮ್ಮಬೇಕು, ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ಅದರ ರಿಟೆನ್ಷನ್ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಧನಾತ್ಮಕವಾಗಿರುವುದಿಲ್ಲ."ಎಂಬ ದೋಷ ಸಂದೇಶ ಬರುತ್ತದೆ. - ಸೆಲೆಕ್ಟಿವಿಟಿ ಮಿತಿ: ಸೆಲೆಕ್ಟಿವಿಟಿ 1 ಅಥವಾ ಅದಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಾದರೆ,
"ರಿಟೆನ್ಷನ್ ಟೈಮ್ಗಳು ಸೆಲೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯನ್ನು 1 ಅಥವಾ ಅದಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಯಾವುದೇ ಪ್ಲೇಟ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯು ಈ ಜೋಡಿಯನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ — ಮೊದಲು ಮೊಬೈಲ್ ಅಥವಾ ಸ್ಟೇಷನರಿ ಫೇಸ್ ಅನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ."ಎಂಬ ಸಂದೇಶ ಬರುತ್ತದೆ. - ಮಿತಿ ಮೀರಿದ ಮೌಲ್ಯ: ಲೆಕ್ಕಾಚಾರದ ಮೌಲ್ಯವು ಬೆಂಬಲಿತ ಮಿತಿಯನ್ನು ಮೀರಿದರೆ,
"ಒಂದು ಮೌಲ್ಯ ಅಥವಾ ಮಧ್ಯಂತರ ಫಲಿತಾಂಶವು ಬೆಂಬಲಿತ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಮಿತಿಯನ್ನು ಮೀರಿದೆ."ಎಂಬ ದೋಷ ಸಂದೇಶ ಬರುತ್ತದೆ.
ಡೇಟಾ ಗೌಪ್ಯತೆ ಮತ್ತು ಸಂಸ್ಕರಣೆ
ಈ ಉಪಕರಣದಲ್ಲಿ ಸುರಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ಗೌಪ್ಯತೆಗೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ಆದ್ಯತೆ ನೀಡಲಾಗಿದೆ. ಬಳಕೆದಾರರು ನಮೂದಿಸುವ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಸಂಖ್ಯೆಯೂ ಅವರದೇ ವೆಬ್ ಬ್ರೌಸರ್ನಲ್ಲೇ ಸ್ಥಳೀಯವಾಗಿ ಸಂಸ್ಕರಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ. ಯಾವುದೇ ಡೇಟಾ ಅಥವಾ ನಮೂದಿಸಿದ ಸಂಖ್ಯೆಗಳನ್ನು ಯಾವುದೇ ಬಾಹ್ಯ ಸರ್ವರ್ಗೆ ಅಪ್ಲೋಡ್ ಮಾಡಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ.
ಈ ಉಪಕರಣ ಯಾರಿಗೆ ಉಪಯುಕ್ತ?
- ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರಜ್ಞರು ಮತ್ತು ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫರ್ಗಳು: HPLC ಅಥವಾ GC ವಿಧಾನ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸುವಾಗ ಸಕ್ರಿಯ ಪದಾರ್ಥಗಳು ಅಥವಾ ಕಲ್ಮಶಗಳು ಫಾರ್ಮಾಕೋಪಿಯಾ ಮಾನದಂಡಗಳಿಗೆ (USP <621> ಅಥವಾ Ph.Eur. 2.2.46) ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕಗೊಂಡಿವೆಯೇ ಎಂದು ಪರಿಶೀಲಿಸಲು.
- ಗುಣಮಟ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಣ (QC) ತಂತ್ರಜ್ಞರು: ದಿನನಿತ್ಯದ ಮಾದರಿ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸುವ ಮೊದಲು ಸಿಸ್ಟಮ್ ಸೂಕ್ತತೆಯ ಮಾನದಂಡಗಳನ್ನು ಪೂರೈಸಲಾಗಿದೆಯೇ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಪೀಕ್ ಇಂಟಿಗ್ರೇಷನ್ ವರದಿಗಳಿಂದ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲು.
- ವಿಧಾನ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸುವವರು: ಕಳಪೆಯಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕಗೊಂಡ ಪೀಕ್ಗಳನ್ನು ಉತ್ತಮಗೊಳಿಸಲು ಎಷ್ಟು ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಪ್ಲೇಟ್ಗಳು ಅಥವಾ ಯಾವ ಮಟ್ಟದ ಸೆಲೆಕ್ಟಿವಿಟಿ (α) ಮತ್ತು ರಿಟೆನ್ಷನ್ (k′) ಅಗತ್ಯವಿದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು.
- TLC ಬಳಕೆದಾರರು: ತೆಳುವಾದ ಪದರದ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ (TLC) ಪ್ಲೇಟ್ನಲ್ಲಿನ ಸ್ಪಾಟ್ಗಳ ವಲಸೆ ದೂರ ಮತ್ತು ವ್ಯಾಸವನ್ನು ಮಿಲಿಮೀಟರ್ಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಿಕೊಂಡು ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲು.
ಸಾಮಾನ್ಯ ಪ್ರಶ್ನೆಗಳು (FAQ)
ಪ್ರಶ್ನೆ: ಯಾವ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಅನ್ನು "ಬೇಸ್ಲೈನ್ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ" ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ? ಉತ್ತರ: ಸಮಾನ ಗಾತ್ರದ, ಸಮ್ಮಿತೀಯವಾದ ಎರಡು ಪೀಕ್ಗಳಿಗೆ Rs = 1.5: ಅವುಗಳ ಕೇಂದ್ರಗಳು ಆರು ಪ್ರಮಾಣಿತ ವಿಚಲನಗಳಷ್ಟು (standard deviations) ದೂರದಲ್ಲಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಅತಿಕ್ರಮಣವು ಸುಮಾರು 0.1% ಇರುತ್ತದೆ. Rs = 1.0 ನಲ್ಲಿ ಸರಿಸುಮಾರು 2% ಇನ್ನೂ ಅತಿಕ್ರಮಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಗುರುತಿಸುವಿಕೆಗೆ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಸರಿಯಾಗಿರುತ್ತದೆ ಆದರೆ ನಿಖರವಾದ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣಕ್ಕೆ ಅಲ್ಲ. ವಿಧಾನವನ್ನು ದೃಢವಾಗಿಡಲು ಅನೇಕ ಫಾರ್ಮಾಕೋಪಿಯಾ ಮೊನೊಗ್ರಾಫ್ಗಳು 1.5 ಅಥವಾ 2.0 ಅನ್ನು ಕೇಳುತ್ತವೆ, ಮತ್ತು ದೊಡ್ಡ ಪಕ್ಕದ ಪೀಕ್ನ ಮೇಲಿರುವ ಸಣ್ಣ ಪೀಕ್ಗೆ 1.5 ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ.
ಪ್ರಶ್ನೆ: ಬೇಸ್ಲೈನ್ ಅಗಲ ಅಥವಾ ಅರ್ಧ ಎತ್ತರದ ಅಗಲ — ನಾನು ಯಾವುದನ್ನು ಬಳಸಬೇಕು? ಉತ್ತರ: ನಿಮ್ಮ ಮೊನೊಗ್ರಾಫ್, SOP ಅಥವಾ ಡೇಟಾ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಹೆಸರಿಸುವ ಸೂತ್ರವನ್ನು ಬಳಸಿ ಮತ್ತು ಹೋಲಿಕೆಗಳಿಗಾಗಿ ಅದನ್ನೇ ಮುಂದುವರಿಸಿ. ಟ್ಯಾಂಜೆಂಟ್ (ಬೇಸ್ಲೈನ್) ಅಗಲವು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಫಾರ್ಮಾಕೋಪಿಯಾ ರೂಪವಾಗಿದೆ; ಶಬ್ದವಿರುವ ಅಥವಾ ಭಾಗಶಃ ವಿಲೀನಗೊಂಡ ಪೀಕ್ಗಳಲ್ಲಿ ಅರ್ಧ ಎತ್ತರದ ಅಗಲವನ್ನು ಅಳೆಯುವುದು ಸುಲಭ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಸಾಫ್ಟ್ವೇರ್ಗಳು ಇದನ್ನೇ ವರದಿ ಮಾಡುತ್ತವೆ. ಸಮ್ಮಿತೀಯ ಪೀಕ್ಗಾಗಿ ಇವೆರಡೂ ಶೇಕಡಾವಾರು ಭಿನ್ನರಾಶಿಯೊಳಗೆ ಒಪ್ಪುತ್ತವೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಗಾಸಿಯನ್ ಪೀಕ್ ಬೇಸ್ಲೈನ್ನಲ್ಲಿ 4σ ಅಗಲ ಮತ್ತು ಅರ್ಧ ಎತ್ತರದಲ್ಲಿ 2.355σ ಇರುತ್ತದೆ.
ಪ್ರಶ್ನೆ: ನನ್ನ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ — ಅದನ್ನು ಸುಧಾರಿಸುವುದು ಯಾವುದು? ಉತ್ತರ: ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಸೂತ್ರವು ಮೂರು ಲಿವರ್ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ದಕ್ಷತೆ N (ಉದ್ದವಾದ ಕಾಲಮ್ ಅಥವಾ ಸಣ್ಣ ಕಣಗಳು) ಅದರ ವರ್ಗಮೂಲದೊಂದಿಗೆ ಮಾತ್ರ ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ N ಅನ್ನು ದ್ವಿಗುಣಗೊಳಿಸುವುದರಿಂದ Rs ಸುಮಾರು 41% ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ. ಸೆಲೆಕ್ಟಿವಿಟಿ α (ವಿಭಿನ್ನ ಕಾಲಮ್ ಕೆಮಿಸ್ಟ್ರಿ ಅಥವಾ ಮೊಬೈಲ್-ಫೇಸ್ ಸಂಯೋಜನೆ) ಅತ್ಯಂತ ಪ್ರಬಲವಾದ ಲಿವರ್ ಆಗಿದೆ. ರಿಟೆನ್ಷನ್ k′ ಕಡಿಮೆ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚು ಮುಖ್ಯವಾಗಿದೆ — ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಗಳು k′ ಸುಮಾರು 2 ಮತ್ತು 10 ರ ನಡುವೆ ಇದ್ದಾಗ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತವೆ. ಕಾಲಮ್-ಪ್ಯಾರಾಮೀಟರ್ಗಳ ಮೋಡ್ ನಿಮ್ಮ α ಮತ್ತು k′ ಗೆ Rs = 1.5 ಗಾಗಿ ನಿಖರವಾಗಿ ಎಷ್ಟು ಪ್ಲೇಟ್ಗಳು ಬೇಕಾಗುತ್ತವೆ ಎಂಬುದನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ.
ಪ್ರಶ್ನೆ: ನಾನು ಇದನ್ನು TLC ಪ್ಲೇಟ್ಗಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದೇ? ಉತ್ತರ: ಹೌದು. ಅದೇ ಅರ್ಧ ಎತ್ತರದ ಸೂತ್ರವು ಪ್ಲೇಟ್ನಲ್ಲಿನ ವಲಸೆ ದೂರಗಳಿಗೂ ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ: ಎರಡು ಸ್ಪಾಟ್ಗಳು ಚಲಿಸಿದ ದೂರವನ್ನು ರಿಟೆನ್ಷನ್ ಮೌಲ್ಯಗಳಾಗಿ ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ವ್ಯಾಸವನ್ನು ಅಗಲವಾಗಿ ನಮೂದಿಸಿ, ಎಲ್ಲವೂ ಮಿಲಿಮೀಟರ್ಗಳಲ್ಲಿರಲಿ. Rs ಒಂದು ಅನುಪಾತವಾಗಿದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಯೂನಿಟ್ ರದ್ದಾಗುತ್ತದೆ — ಸ್ಥಿರತೆಯಷ್ಟೇ ಇಲ್ಲಿ ಮುಖ್ಯವಾಗಿದೆ.