ಮಾಲಿಕ್ಯೂಲರ್ ಬಯಾಲಜಿಯಲ್ಲಿ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಪರಿವರ್ತನೆಗಳು
ಡಿಎನ್ಎ (DNA) ಮತ್ತು ಆರ್ಎನ್ಎ (RNA) ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಕೆಲಸ ಮಾಡುವಾಗ, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ ಸರಪಳಿಯ ವಿರುದ್ಧ ಎಳೆಯನ್ನು ಅಥವಾ ಅದರ ಹಿಮ್ಮುಖ ದಿಕ್ಕನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸುವುದು ಸಂಶೋಧನೆಯಲ್ಲಿ ಅತ್ಯಗತ್ಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಡಬಲ್ ಹೆಲಿಕ್ಸ್ ರಚನೆಯಲ್ಲಿ ಎರಡು ಎಳೆಗಳು ಪರಸ್ಪರ ವಿರುದ್ಧ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ (Antiparallel) ಸಾಗುತ್ತವೆ. ಈ ಹಿನ್ನೆಲೆಯಲ್ಲಿ, ಒಂದು ಎಳೆಯಿಂದ ಅದರ ಪೂರಕ ಎಳೆಯನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ಪ್ರಮಾಣಿತ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಓದಲು ರಿವರ್ಸ್ ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ.
ಈ ಉಪಕರಣವು ಡಿಎನ್ಎ ಅಥವಾ ಆರ್ಎನ್ಎ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ಗಳ ರಿವರ್ಸ್ ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್, ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ ಅಥವಾ ರಿವರ್ಸ್ ಅನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ಲೆಕ್ಕಾಚಾರ ಮಾಡಲು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ಇದು ಇನ್ಪುಟ್ನಲ್ಲಿರುವ ಅಕ್ಷರಗಳ ಕೇಸ್ (ದೊಡ್ಡಕ್ಷರ ಮತ್ತು ಸಣ್ಣಕ್ಷರಗಳು) ಮತ್ತು IUPAC ಅಸ್ಪಷ್ಟತೆಯ ಕೋಡ್ಗಳನ್ನು ಹಾಗೆಯೇ ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಅಲ್ಲದೆ, FASTA ಹೆಡರ್ ಸಾಲುಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಿ ನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ನಲ್ಲಿರುವ ಅನಗತ್ಯ ಸ್ಪೇಸ್ಗಳು, ಅಂಕಿಗಳು ಹಾಗೂ ವಿರಾಮಚಿಹ್ನೆಗಳನ್ನು ಸ್ವಚ್ಛಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
ಲಭ್ಯವಿರುವ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಗಳು ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಗಣಿತ
ಈ ಉಪಕರಣದಲ್ಲಿ ಬಳಕೆದಾರರು ತಮ್ಮ ಅಗತ್ಯಕ್ಕೆ ತಕ್ಕಂತೆ ಮೂರು ಪ್ರಮುಖ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬಹುದು:
- ರಿವರ್ಸ್ ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ (Reverse complement): ಇದು ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ನ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಬೇಸ್ ಅನ್ನು ಅದರ ಜೋಡಿ ಬೇಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಬದಲಾಯಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇಡೀ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ನ ದಿಕ್ಕನ್ನು ಹಿಮ್ಮುಖಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಗಣಿತದ ಪ್ರಕಾರ, ಮೊದಲು ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ ಮಾಡಿ ನಂತರ ರಿವರ್ಸ್ ಮಾಡುವುದು ಅಥವಾ ಮೊದಲು ರಿವರ್ಸ್ ಮಾಡಿ ನಂತರ ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ ಮಾಡುವುದು ಒಂದೇ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ.
- ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ (Complement): ಇದು ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ನ ದಿಕ್ಕನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸದೆ, ಕೇವಲ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಬೇಸ್ ಅನ್ನು ಅದರ ಪೂರಕ ಬೇಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಬದಲಾಯಿಸುತ್ತದೆ.
- ರಿವರ್ಸ್ (Reverse): ಇದು ಬೇಸ್ಗಳನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸದೆ, ಕೇವಲ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ನ ಕ್ರಮವನ್ನು ಕೊನೆಯಿಂದ ಮೊದಲಿಗೆ ಹಿಮ್ಮುಖಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ ಜೋಡಣೆ ಮತ್ತು IUPAC ನಿಯಮಗಳು
ಡಿಎನ್ಎ ಮತ್ತು ಆರ್ಎನ್ಎ ಬೇಸ್ ಜೋಡಣೆಗಳು ವಿಭಿನ್ನ ರಾಸಾಯನಿಕ ನಿಯಮಗಳನ್ನು ಅನುಸರಿಸುತ್ತವೆ. ಈ ಉಪಕರಣವು ಇನ್ಪುಟ್ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಅನ್ನು ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತವಾಗಿ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಿ ಕೆಳಗಿನ ನಿಯಮಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ:
ಡಿಎನ್ಎ ಮತ್ತು ಆರ್ಎನ್ಎ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವಿಕೆ
- DNA: ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ನಲ್ಲಿ "T" ಅಕ್ಷರವಿದ್ದು "U" ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ, ಅದನ್ನು ಡಿಎನ್ಎ ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇಲ್ಲಿ ಅಡೆನಿನ್ (A) ಥೈಮಿನ್ (T) ನೊಂದಿಗೆ ಜೋಡಿಯಾಗುತ್ತದೆ (A ↔ T) ಮತ್ತು ಸೈಟೋಸಿನ್ (C) ಗ್ವಾನಿನ್ (G) ನೊಂದಿಗೆ ಜೋಡಿಯಾಗುತ್ತದೆ (C ↔ G).
- RNA: ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ನಲ್ಲಿ "U" ಅಕ್ಷರವಿದ್ದು "T" ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ, ಉಪಕರಣವು "RNA ಪತ್ತೆಯಾಗಿದೆ — A ಯು U ನೊಂದಿಗೆ ಜೋಡಿಯಾಗುತ್ತದೆ." ಎಂಬ ಸಂದೇಶವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಇಲ್ಲಿ ಅಡೆನಿನ್ (A) ಯುರಾಸಿಲ್ (U) ನೊಂದಿಗೆ ಜೋಡಿಯಾಗುತ್ತದೆ (A ↔ U).
IUPAC ಡಿಜೆನೆರೇಟ್ ಬೇಸ್ ಸಂಕೇತಗಳು
ಸಂಶೋಧನೆಯಲ್ಲಿ ಅಸ್ಪಷ್ಟ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸಲು IUPAC ಕೋಡ್ಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಉಪಕರಣವು ಕೆಳಗಿನ ಜೋಡಿ ನಿಯಮಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಅವುಗಳನ್ನು ಪರಿವರ್ತಿಸುತ್ತದೆ:
- R ↔ Y
- K ↔ M
- B ↔ V
- D ↔ H
- S, W ಮತ್ತು N ಯಾವುದೇ ಬದಲಾವಣೆಯಿಲ್ಲದೆ ಹಾಗೆಯೇ ಉಳಿಯುತ್ತವೆ.
ಇನ್ಪುಟ್ ಸ್ವರೂಪಗಳು ಮತ್ತು ಸ್ವಚ್ಛಗೊಳಿಸುವಿಕೆ
ಉಪಕರಣವು ಸರಳ ಪಠ್ಯ ಅಥವಾ FASTA ಸ್ವರೂಪದ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ಗಳನ್ನು ಸ್ವೀಕರಿಸುತ್ತದೆ. ಇನ್ಪುಟ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಈ ಕೆಳಗಿನ ನಿಯಮಗಳನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ:
- FASTA ಹೆಡರ್ಗಳು: ಇನ್ಪುಟ್ನಲ್ಲಿ
>ಚಿಹ್ನೆಯಿಂದ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುವ ಒಂದೇ ಒಂದು ಹೆಸರಿನ ಸಾಲಿದ್ದರೆ, ಅದನ್ನು ಫಲಿತಾಂಶದ ಮೇಲ್ಭಾಗದಲ್ಲಿ ಹಾಗೆಯೇ ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು "ಹೆಸರಿನ ಸಾಲನ್ನು ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳಲಾಗಿದೆ." ಎಂಬ ಸಂದೇಶ ಕಾಣಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಒಂದು ವೇಳೆ ಒಂದಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಹೆಸರಿನ ಸಾಲುಗಳು ಕಂಡುಬಂದರೆ, ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಸಾಲುಗಳನ್ನು ಒಂದಾಗಿ ಸೇರಿಸಿ "‹n›ಹೆಸರಿನ ಸಾಲುಗಳು ಕಂಡುಬಂದಿವೆ — ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಸಾಲುಗಳನ್ನು ಒಂದಾಗಿ ಸೇರಿಸಲಾಗಿದೆ." ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. - ಅನಗತ್ಯ ಅಕ್ಷರಗಳ ನಿರ್ಲಕ್ಷಣೆ: ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ನಲ್ಲಿರಬಹುದಾದ ಸ್ಪೇಸ್ಗಳು, ಅಂಕಿಗಳು ಮತ್ತು ವಿರಾಮಚಿಹ್ನೆಗಳನ್ನು ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತವಾಗಿ ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ನಂತರ "ನಿರ್ಲಕ್ಷಿಸಲಾದ
‹n›ಸ್ಪೇಸ್ಗಳು, ಅಂಕಿಗಳು ಮತ್ತು ವಿರಾಮಚಿಹ್ನೆಗಳು." ಎಂಬ ಮಾಹಿತಿ ಲಭ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. - ದೋಷ ಸಂದೇಶಗಳು:
- ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಗರಿಷ್ಠ ಮಿತಿಯನ್ನು ಮೀರಿದರೆ: "ಆ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಈ ಉಪಕರಣಕ್ಕೆ ತುಂಬಾ ಉದ್ದವಾಗಿದೆ. ಇದನ್ನು
‹max›ಅಕ್ಷರಗಳಿಗಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಇರಿಸಿ." ಎಂಬ ದೋಷ ಸಂದೇಶ ಬರುತ್ತದೆ. - ಅನುಮತಿಸದ ಅಕ್ಷರಗಳಿದ್ದರೆ: "ಬೆಂಬಲವಿಲ್ಲದ ಅಕ್ಷರಗಳು:
‹chars›. ಕೇವಲ DNA/RNA ಬೇಸ್ ಅಕ್ಷರಗಳಿಗೆ ಮಾತ್ರ ಅನುಮತಿಯಿದೆ." ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
- ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಗರಿಷ್ಠ ಮಿತಿಯನ್ನು ಮೀರಿದರೆ: "ಆ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಈ ಉಪಕರಣಕ್ಕೆ ತುಂಬಾ ಉದ್ದವಾಗಿದೆ. ಇದನ್ನು
ಮಾಲಿಕ್ಯೂಲರ್ ಬಯಾಲಜಿಯಲ್ಲಿ ಇದರ ಅನ್ವಯಗಳು
- ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರೈಮರ್ ವಿನ್ಯಾಸ (PCR Primer Design): ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳನ್ನು ಯಾವಾಗಲೂ 5'→3' ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಬರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ರಿವರ್ಸ್ ಪ್ರೈಮರ್ ಗುರಿಯ ಕೊನೆಯ ತುದಿಯಲ್ಲಿ ಎದುರು ಎಳೆಗೆ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವುದರಿಂದ, ಆ ತುದಿಯ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ನ ರಿವರ್ಸ್ ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ ಅನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯುವುದು ಅತ್ಯಗತ್ಯ.
- ಪೂರಕ ಎಳೆಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ: ಸಂಶೋಧಕರು ತಮ್ಮ ಪ್ರಸ್ತುತ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ನೊಂದಿಗೆ ವಾಸ್ತವವಾಗಿ ಬೇಸ್-ಜೋಡಣೆಯನ್ನು ರೂಪಿಸುವ ನಿಖರವಾದ ಎಳೆಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಇದು ನೆರವಾಗುತ್ತದೆ.
- ಡಿಜೆನೆರೇಟ್ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ಗಳ ನಿರ್ವಹಣೆ: IUPAC ಅಸ್ಪಷ್ಟತೆಯ ಕೋಡ್ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ಗಳನ್ನು ಹಸ್ತಚಾಲಿತವಾಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸುವಾಗ ತಪ್ಪುಗಳಾಗುವ ಸಾಧ್ಯತೆ ಹೆಚ್ಚು, ಈ ಉಪಕರಣವು ಅದನ್ನು ನಿಖರವಾಗಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ.
ಗೌಪ್ಯತೆ ಮತ್ತು ಡೇಟಾ ಸಂಸ್ಕರಣೆ
ನಿಮ್ಮ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ನಿಮ್ಮ ಸಾಧನದಲ್ಲಿಯೇ ಇರುತ್ತದೆ. ಇನ್ಪುಟ್ ಮಾಡುವ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಅನ್ನು ಯಾವುದೇ ಬಾಹ್ಯ ಸರ್ವರ್ಗೆ ಅಪ್ಲೋಡ್ ಮಾಡಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಎಲ್ಲಾ ಪರಿವರ್ತನೆಗಳು ಮತ್ತು ಲೆಕ್ಕಾಚಾರಗಳು ಸ್ಥಳೀಯವಾಗಿ ನಿಮ್ಮ ವೆಬ್ ಬ್ರೌಸರ್ನಲ್ಲಿಯೇ ನಡೆಯುತ್ತವೆ.
ಸಾಮಾನ್ಯ ಪ್ರಶ್ನೆಗಳು (FAQ)
ಪ್ರಶ್ನೆ: ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ ಮತ್ತು ರಿವರ್ಸ್ ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸವೇನು?
ಉತ್ತರ: ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ (Complement) ಪ್ರತಿ ಬೇಸ್ ಅನ್ನು ಅದರ ಜೋಡಿ ಬೇಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಬದಲಾಯಿಸುತ್ತದೆ (A ಗೆ T, C ಗೆ G) ಆದರೆ ಮೂಲ ಕ್ರಮವನ್ನು ಹಾಗೆಯೇ ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಇದು 3'→5' ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಓದುತ್ತದೆ. ರಿವರ್ಸ್ ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ (Reverse complement) ಕ್ರಮವನ್ನೂ ಸಹ ಉಲ್ಟಾ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ನಿಮಗೆ ಪರಿಚಿತವಿರುವ 5'→3' ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಎದುರು ಎಳೆಯನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ — ಇದು ವಾಸ್ತವವಾಗಿ ನಿಮ್ಮ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಬೇಸ್-ಜೋಡಣೆಯನ್ನು ರೂಪಿಸುವ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಆಗಿದೆ.
ಪ್ರಶ್ನೆ: ರಿವರ್ಸ್ PCR ಪ್ರೈಮರ್ ಏಕೆ ರಿವರ್ಸ್ ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ?
ಉತ್ತರ: ಪ್ರೈಮರ್ಗಳನ್ನು 5'→3' ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಬರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ರಿವರ್ಸ್ ಪ್ರೈಮರ್ ಗುರಿಯ ಕೊನೆಯ ತುದಿಯಲ್ಲಿ ಎದುರು ಎಳೆಗೆ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ನೀವು ಆ ತುದಿಯಲ್ಲಿರುವ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಂಡು ಅದರ ರಿವರ್ಸ್-ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ ಮಾಡಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ಇದರ ಫಲಿತಾಂಶವು ಮರಳಿ ಗುರಿಯ ಕಡೆಗೆ ನಿರ್ದೇಶಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇದು ನೀವು ಆರ್ಡರ್ ಮಾಡುವ ನಿಖರವಾದ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಆಗಿರುತ್ತದೆ.
ಪ್ರಶ್ನೆ: ನಾನು N, R ಅಥವಾ Y ನಂತಹ ಅಸ್ಪಷ್ಟತೆಯ ಕೋಡ್ಗಳನ್ನು ಅಂಟಿಸಬಹುದೇ?
ಉತ್ತರ: ಹೌದು. ಡಿಜೆನೆರೇಟ್ IUPAC ಅಕ್ಷರಗಳು ತಮ್ಮದೇ ಆದ ಜೋಡಿ ನಿಯಮಗಳನ್ನು ಅನುಸರಿಸುತ್ತವೆ: R ಅಕ್ಷರವು Y ನೊಂದಿಗೆ, K ಅಕ್ಷರವು M ನೊಂದಿಗೆ, B ಅಕ್ಷರವು V ನೊಂದಿಗೆ ಮತ್ತು D ಅಕ್ಷರವು H ನೊಂದಿಗೆ ಬದಲಾಗುತ್ತವೆ, ಆದರೆ S, W ಮತ್ತು N ಯಾವುದೇ ಬದಲಾವಣೆಯಿಲ್ಲದೆ ಹಾಗೆಯೇ ಉಳಿಯುತ್ತವೆ. ಅಕ್ಷರಗಳ ಕೇಸ್ (ದೊಡ್ಡಕ್ಷರ/ಸಣ್ಣಕ್ಷರ) ಸಂರಕ್ಷಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಸಣ್ಣಕ್ಷರದ ರೀಜನ್ ಮಾರ್ಕರ್ಗಳು ಹಾಗೆಯೇ ಉಳಿಯುತ್ತವೆ.
ಪ್ರಶ್ನೆ: ಇದು RNA ನೊಂದಿಗೆ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆಯೇ ಮತ್ತು FASTA ಹೆಡರ್ಗಳಿಗೆ ಏನಾಗುತ್ತದೆ?
ಉತ್ತರ: ಹೌದು. T ಇಲ್ಲದೆ ಕೇವಲ U ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಅನ್ನು RNA ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ A ಯು U ನೊಂದಿಗೆ ಜೋಡಿಯಾಗುತ್ತದೆ; ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ A ಯು T ನೊಂದಿಗೆ ಜೋಡಿಯಾಗುತ್ತದೆ. ಆರಂಭದಲ್ಲಿರುವ > ಹೆಸರಿನ ಸಾಲನ್ನು ಫಲಿತಾಂಶದ ಮೇಲ್ಭಾಗದಲ್ಲಿ ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಸ್ಪೇಸ್ಗಳು, ಅಂಕಿಗಳು ಮತ್ತು ವಿರಾಮಚಿಹ್ನೆಗಳನ್ನು ಸ್ವಚ್ಛಗೊಳಿಸಿ ಇನ್ಪುಟ್ನ ಕೆಳಗೆ ಲೆಕ್ಕ ಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ.