Áireamhán Rúin Scartha Crómatagrafaíochta

Bunús Matamaiticiúil an Rúin Scartha sa Chrómatagrafaíocht

Is é an rún scartha (Rₛ) an tomhas cainníochtúil ar chumas córais chrómatagrafaíochta dhá chomhpháirt a scaradh óna chéile de réir mar a elúann siad as an gcolún. Ag croílár na matamaitice seo, tá teoiric na mbuaiceanna Gaussacha. Nuair a bhíonn buaic shiméadrach agus i gcruth cloig, is féidir a leithead a chur in iúl i dtéarmaí an diall chaighdeánaigh (σ).

Sna foirmlí praiticiúla, úsáidtear dhá phríomhtheicníocht chun an leithead a thomhas: an leithead ag an mbunlíne agus an leithead ag an leathairde. Tá leithead an bhunlíne bunaithe ar thadhlaí na línte infhillte a tharraingt go dtí an bhunlíne, rud a thugann leithead atá cothrom le 4σ. Nuair a úsáidtear an leithead ag an leathairde, tomhaistear leithead na buaice ag 50% dá hairde uasta, luach atá cothrom le 2.355σ go matamaiticiúil. Tagann na comhéifeachtaí uimhriúla sna foirmlí (2 le haghaidh an bhunlíne agus 1.18 le haghaidh an leathairde) go díreach as na cóimheasa geoiméadracha seo chun a chinntiú go dtugann an dá mhodh toradh inchomparáide nuair atá na buaiceanna breá siméadrach.

Caighdeáin na gCógasleabhar: USP <621> in aghaidh Ph.Eur. 2.2.46

I dtimpeallachtaí rialáilte, amhail saotharlanna anailíseacha agus rialú cáilíochta, tá sé ríthábhachtach cloí leis na foirmlí sonraithe atá leagtha síos ag na cógasleabhair idirnáisiúnta. Sainmhíníonn Pharmacopeia na Stát Aontaithe (USP <621>) agus Pharmacopoeia na hEorpa (Ph.Eur. 2.2.46) na rialacha maidir le ríomh an rúin scartha chun comhoiriúnacht córais a dheimhniú.

• An Foirmle Bunlíne (USP <621>): Úsáideann an modh seo leithid thadhlaíocha ag an mbunlíne. Sna bogearraí, taispeántar an fhoirmle seo mar "Rs = 2(tR2 − tR1) ÷ (w₁ + w₂) — USP <621>, leithid thadhlaíocha ag an mbunlíne".
• An Foirmle Leathairde (USP <621> / Ph.Eur. 2.2.46): Úsáideann an modh seo leithid na mbuaiceanna ag an leathairde. Sna bogearraí, taispeántar an fhoirmle seo mar "Rs = 1.18(tR2 − tR1) ÷ (w½,₁ + w½,₂) — USP <621> / Ph.Eur. 2.2.46, leithid ag an leathairde".

Cé go n-aontaíonn an dá mhodh seo ar bhuaiceanna foirfe, is minic a roghnaítear an fhoirmle leathairde i gcásanna praiticiúla mar go bhfuil sé níos fusa an leathairde a thomhas go cruinn nuair a bhíonn torann ar an mbunlíne nó nuair nach bhfuil na buaiceanna scartha go hiomlán fós.

Trí Luamhán Chothromóid Purnell

Nuair nach bhfuil na sonraí teoranta do leithid na mbuaiceanna amháin, is féidir an rún scartha a ríomh as paraiméadair fhisiceacha an cholúin ag baint úsáide as Cothromóid Purnell: Rₛ = (√(N) ÷ 4) · ((α - 1) ÷ α) · (k′₂ ÷ (1 + k′₂)) Sna bogearraí, taispeántar an fhoirmle seo mar "Rs = (√N ÷ 4) · ((α − 1) ÷ α) · (k′₂ ÷ (1 + k′₂)) — an chothromóid rúin scartha". Léiríonn an chothromóid seo go bhfuil rún scartha á rialú ag trí fhachtóir neamhspleácha:

1. Éifeachtúlacht (N): Léiríonn líon na bplátaí teoiriciúla (N) cáilíocht pacála an cholúin. Ós rud é go bhfuil Rₛ i gcomhréir le √(N), teastaíonn méadú ceithre huaire ar líon na bplátaí chun an rún scartha a dhúbailt.
2. Roghnaíocht (α): Is é seo an cóimheas idir fachtóirí coinneála an dá chomhpháirt (α = k′₂ ÷ k′₁). Is é an roghnaíocht an luamhán is cumhachtaí; athruithe beaga ar an gcéim statach nó ar an gcéim shoghluaiste a athraíonn α, is féidir leo rún scartha lag a fheabhsú go tapa.
3. Coinneáil (k′): Is é an fachtóir coinneála (k′) an cóimheas idir an t-am a chaitheann an t-anailít sa chéim statach i gcomparáid leis an gcéim shoghluaiste. Tá tionchar k′ níos suntasaí ag luachanna ísle (faoi bhun 2); thar luach 10, is beag feabhsúchán breise a thugann méadú ar an gcoinneáil ar an rún scartha.

Treoir maidir le hIonchur Sonraí agus Úsáid an Áireamháin

Chun an t-áireamhán a úsáid, roghnaigh an modh cuí faoi "Sonraí tosaigh":

Modh 1: Leithid bhuaice

1. Roghnaigh an pointe tomhais faoi "Leithead tomhaiste ag": "Bunlíne (USP 2×)" nó "Leathairde (USP 1.18×)".
2. Iontráil "Am coinneála an chéad bhuaic" agus "Am coinneála an dara buaic".
3. Iontráil "Leithead an chéad bhuaic" agus "Leithead an dara buaic".

Modh 2: Paraiméadair cholúin

1. Iontráil "Am marbh".
2. Iontráil "Am coinneála an chéad bhuaic" agus "Am coinneála an dara buaic".
3. Iontráil "Plátaí teoiriciúla".

Is féidir an t-aonad (nóiméid nó soicindí) a roghnú faoi "Aonad na luachanna iontráilte" chun an spásáil bhuaice agus suim na leithid a thaispeáint i gceart, ach ní athraíonn sé seo an luach Rₛ deiridh mar gur cóimheas gan aonad é. Is féidir an cnaipe "Luchtaigh sampla" a úsáid chun sonraí samplacha a luchtú, nó "Glan" chun na réimsí go léir a ghlanadh.

Rialacha Ríofa, Teorainneacha agus Earráidí

Chun torthaí cruinne a chinntiú, ní mór cloí leis na rialacha seo a leanas:

• Comhsheasmhacht Aonad: Ní dhéanann an t-áireamhán tiontú aonad. Ní mór do gach luach iontráilte an t-aonad céanna a roinnt (m.sh. nóiméid go léir nó soicindí go léir).
• Siméadracht na mBuaiceanna: Glacann na foirmlí leis go bhfuil na buaiceanna siméadrach. Má tá táilliú nó tosaíocht suntasach ar na buaiceanna, beidh an rún scartha ríofa níos airde ná an scaradh iarbhír.
• Rún Scartha Íseal: Ag luachanna an-íseal, bíonn sé deacair leithid na mbuaiceanna a thomhas go cruinn, agus ba cheart bogearraí comhtháthaithe a úsáid chun cásanna teorannacha a dheimhniú.
• Tairseach an Scartha: Meastar Rₛ = 1.5 mar an caighdeán le haghaidh scaradh bunlíne idir dhá bhuaic chomhchosúla (forluí thart ar 0.1%). Teastaíonn rún níos airde má tá méideanna na mbuaiceanna an-difriúil.

Teachtaireachtaí Earráide sa Chomhéadan

• Má iontráiltear luach neamh-uimhriúil: "‹field›: ní uimhir é “‹token›”."
• Má tá am coinneála nó leithead nialas nó diúltach: "Ní mór ‹field› a bheith níos mó ná nialas." nó "Ní mór ‹field› a bheith níos mó ná nialas."
• Má tá an dara ham coinneála níos lú ná an chéad cheann: "Ní mór don dara buaic elútar tar éis an chéad chinn — babhtáil na hamanna coinneála má tá siad droim ar ais."
• Má tá an t-am marbh nialas nó diúltach: "Ní mór don am marbh a bheith níos mó ná nialas."
• Má elúann an chéad bhuaic roimh an am marbh: "Ní mór don chéad bhuaic elútar tar éis an ama mhairbh, nó níl a fachtóir coinneála deimhneach."
• Má tá líon na bplátaí nialas nó diúltach: "Ní mór do líon na bplátaí a bheith níos mó ná nialas."
• Má tá an roghnaíocht ríofa 1 nó níos lú: "Fágann na hamanna coinneála go bhfuil an roghnaíocht ag 1 nó níos lú, mar sin ní féidir le haon líon plátaí an péire seo a scaradh — caithfear an chéim shoghluaiste nó an chéim statach a athrú ar dtús."
• Má sháraíonn luach an raon uimhreacha: "Sáraíonn luach nó toradh idirmheánach an raon uimhreacha a dtacaítear leis."

Príobháideacht agus Próiseáil Sonraí

Déantar gach ríomh go háitiúil laistigh de bhrabhsálaí gréasáin an úsáideora. Ní uaslódáiltear aon sonraí ná uimhreacha iontráilte chuig freastalaí seachtrach.

Ceisteanna Coitianta

Leithead bunlíne nó leithead leathairde — cé acu ceann ba cheart dom a úsáid?

Úsáid an ceann a ainmníonn do mhonagraf, do SOP nó do chóras sonraí, agus cloí leis le haghaidh comparáidí. Is é an leithead tadhlaíoch (bunlíne) an fhoirm chlasaiceach chógaisíochta; is fusa an leithead leathairde a thomhas ar bhuaiceanna torannacha nó ar bhuaiceanna atá cumasctha go páirteach, agus is é sin a thuairiscíonn an chuid is mó de bhogearraí crómatagrafaíochta. I gcás buaic shiméadrach, aontaíonn an dá cheann laistigh de chodán de chéatadán, toisc go bhfuil buaic Ghasach 4σ ar leithead ag an mbunlíne agus 2.355σ ag an leathairde.

Cén rún scartha a mheastar mar “scaradh bunlíne”?

Rs = 1.5 le haghaidh dhá bhuaic chomhchosúla shiméadracha: tá a n-ionaid suite sé dhiall chaighdeánacha óna chéile agus tá an forluí thart ar 0.1%. Ag Rs = 1.0 forluíonn thart ar 2% fós, rud atá ceart go leor go minic le haghaidh aithneacháin ach nach bhfuil le haghaidh cainníochtaithe chruinn. Lorgaíonn go leor monagraf cógaisíochta 1.5 nó 2.0 chun an modh a choinneáil láidir, agus teastaíonn níos mó ná 1.5 ó bhuaic bheag atá ag marcaíocht ar chomharsa mór.

Tá mo rún scartha ró-íseal — cad a fheabhsaíonn é?

Tá trí luamhán ag an gcothromóid rúin scartha. Ní chabhraíonn an éifeachtúlacht N (colún níos faide nó cáithníní níos lú) ach lena fréamh chearnach, mar sin má dhéantar N a dhúbailt ardaítear Rs thart ar 41%. Is í an roghnaíocht α (ceimic colúin dhifriúil nó comhdhéanamh céime soghluaiste difriúil) an luamhán is láidre. Is mó is tábhachtaí an choinneáil k′ sa raon íseal — oibríonn scaradh is fearr le k′ idir thart ar 2 agus 10. Taispeánann an modh paraiméadar colúin go díreach cé mhéad pláta a bheadh ag teastáil ó do α agus k′ le haghaidh Rs = 1.5.

An féidir liom é seo a úsáid le haghaidh pláta TLC?

Is féidir. Tá feidhm ag an bhfoirmle leathairde chéanna maidir le faid imirce ar phláta: iontráil na faid a thaistil an dá spota mar na luachanna coinneála agus a dtrastomhais mar na leithid, iad go léir i milliméadair. Is cóimheas é Rs, mar sin cealaítear an t-aonad — is í an chomhsheasmhacht an t-aon rud atá tábhachtach.